RhoNox-1 is a fluorescent probe for the specific detection of divalent iron ions, and when RhoNox-1 reacts with Fe²⁺. RhoNox-1 can generate an irreversible orange (red) fluorescent product (Ex/Em：540/575 nm) . FeRhoNox-1 can enter the cell well, suitable for the detection of Fe²⁺in living cells, and tends to be localized in the Golgi apparatus^[1].

1.RhoNox-1 工作液的配制
1.1 制备储存液
用 110 μL 无水 DMSO 配制 50 μg 的 RhoNox-1 得到 1 mM 储备液。
1.2 工作液的配制
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，配制成 1-10 μM 的 RhoNox-1 工作液。
注：请根据实际情况调整 RhoNox-1 工作液浓度，且现用现配。
2. 细胞染色(悬浮细胞)
2.1 悬浮细胞：离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在1×10⁶/mL
2.2 加入 1 mL工作液，室温孵育 5-30 分钟。
2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。
2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。
2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
3. 细胞染色(贴壁细胞)
3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。
3.3 加入 100μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，室温孵育5-30 分钟。
3.4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟 ，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。

458.55

C₂₈H₃₀N₂O₄

1447815-38-4

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