E 64d

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E 64d

本产品不向个人销售，仅用作科学研究，不用于任何人体实验及非科研性质的动物实验。

CAS NO:

88321-09-9

包装与价格：

包装	价格(元)
10mM (in 1mL DMSO)	询价
1mg	询价
5mg	询价
25mg	询价
100mg	询价

化学性质

Physical Appearance	A solid
Storage	Store at -20°C
M.Wt	342.43
Cas No.	88321-09-9
Formula	C₁₇H₃₀N₂O₅
Solubility	insoluble in H2O; ≥17.12 mg/mL in DMSO; ≥18.5 mg/mL in EtOH
Chemical Name	ethyl (2S,3S)-3-[[(2S)-4-methyl-1-(3-methylbutylamino)-1-oxopentan-2-yl]carbamoyl]oxirane-2-carboxylate
Canonical SMILES	CCOC(=O)C1C(O1)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NCCC(C)C
运输条件	蓝冰运输或根据您的需求运输。
一般建议	为了使其更好的溶解，请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限，请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。溶液形式一般不宜长期储存，请尽快用完。

资料参考

E-64d是E-64c的膜通透性衍生物和巯基蛋白酶的抑制剂，被用于检测其对完整血小板中钙蛋白酶（calpain）的抑制活性。

E-64c或E-64d均可以抑制钙蛋白酶的活性。将完整血小板与抑制剂孵育10分钟，在裂解前洗去细胞外的抑制剂，E-64c和leupeptin均不能抑制蛋白水解，但E-64d可以。E-64d能够进入血小板，不会通过洗涤而除去。然而，E-64c和E-64d均能够抑制裂解血小板中的蛋白酶活性。由于该蛋白酶的活性是Ca²⁺依赖型的，而且能够被钙蛋白酶抑制剂抑制，因而被认为是钙蛋白酶。E-64d能够进入完整的血小板：i)洗涤除去细胞外的抑制剂，裂解血小板后检测不到蛋白酶活性；ii)与E-64d而非E-64c孵育，可以激活血小板，从而抑制由A23187和钙激活的完整血小板中钙蛋白酶的水解活性。

参考文献：
1. M. Tamai, K. Matsumoto, S. Omura, I. Koyama, Y. Ozawa, K. Hanada J. Pharmacobio-Dyn., 9 (1986), pp. 672–677.
2. E. B. McGowan, E. Becker, and T. C. Detwiler, INHIBITION OF CALPAIN IN INTACT PLATELETS BY THE THIOL PROTEASE INHIBITOR E-64d. BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS , Vol. 158, No. 2, 1989.
3. Carmen JC, Sinai AP. The Differential Effect of Toxoplasma Gondii Infection on the Stability of BCL2-Family Members Involves Multiple Activities. Front Microbiol. 2011 Jan 24; 2:1.

试验操作

细胞实验[1]：
细胞系	血小板
溶解方法	在DMSO中的溶解度 >10 mM。为了获得更高的浓度，可以将离心管在37°C加热10分钟和/或在超声波浴中震荡一段时间。原液可以在-20°C以下储存几个月。
反应条件	50 μg/mL；10 min
应用	A23187和钙可以共同激活血小板，它们也可以导致calpain催化的ABP和talin蛋白水解。在缺乏抑制剂时，A23187导致ABP和talin的完全降解。E 64d是细胞通透性的抑制剂，抑制细胞内的蛋白水解，有些抑制在最低测试浓度 20 μg/mL 时观察到，而50 μg/mL 浓度的E 64d基本可以完全抑制蛋白水解。
动物实验[2]：
动物模型	雄性Sprague-Dawley大鼠
剂量	4 μg；腹腔注射
应用	E 64d治疗后，小鼠用penicillin处理诱导癫痫反复发作。结果表明，E 64d显著减少在齿状回颗粒上层和海马CA3区域的异常苔藓纤维发芽。在无E 64d治疗大鼠中，在齿状回和CA3区域的锥体层有明显的苔藓纤维末端聚集。而在E 64d治疗大鼠中，在齿状回颗粒上层和CA3区域中的苔藓纤维末端聚集显著减少。
注意事项	请测试所有化合物在室内的溶解度，实际溶解度和理论值可能略有不同。这是由实验系统的误差引起的，属于正常现象。
References: [1] McGowan E B, Becker E, Detwiler T C. Inhibition of calpain in intact platelets by the thiol protease inhibitor E-64d. Biochemical and biophysical research communications, 1989, 158(2): 432-435. [2] Ni H, Ren S, Zhang L, et al. Expression profiles of hippocampal regenerative sprouting-related genes and their regulation by E-64d in a developmental rat model of penicillin-induced recurrent epilepticus. Toxicology letters, 2013, 217(2): 162-169.

生物活性

E-64d (合成的E-64的类似物、E-64c的乙基酯)是一个不可逆的、膜通透性的溶酶体和胞浆半胱氨酸蛋白酶抑制剂，抑制钙蛋白酶（calpain）和半胱氨酸蛋白酶cathepsins F、K、B、H和L。.
靶点	cathepsins F	cathepsins K	cathepsins B	cathepsins H	cathepsins L
IC50